آنالیز مولکولی ژنهای مولد پنی سیلین در گونه های مختلف قارچ penicillium

پنی سیلین از جمله مهم ترین آنتی بیوتیکی است که تا به حال شناسایی شده است. در این بررسی مجموعه مطالعات کیفی، کمی و مولکولی روی 17 گونه پنی سیلیوم انجام گرفت. بررسی ها در سه بخش تست های آنتی باکتریال، تولید، استخراج و اندازه گیری پنی سیلین و بررسی های مولکولی شامل ردیابی و مطالعه بیان ژن های مرتبط با سنتز صورت گرفت. در آزمون های آنتی باکتریال باکتریهای گرم منفی و مثبت متعدد در تقابل با پنی سیلیوم های مورد بررسی قرار گرفتند. دربررسی وجود پنی سیلین g، ابتدا قارچ ها در محیط pdb کشت و 8 روز بعد از رشد کامل قارچها، مراحل استخراج آنتی بیوتیک انجام و آنالیز توسط hplc انجام شد. در این پژوهش مشخص شد بسیاری از گونه ها قادر به آنتی بیوتیک پنی سیلین g با مقادیر متفاوت می باشند. بیشترین میزان پنی سیلین تولیدی متعلق به گونه p. janthinellum بود. در بررسی های کمی و کیفی به منظور ارزیابی تولید پنی سیلین جی میزان پنی سیلین تولیدی جدایه ها اندازه گیری و غالب گونه ها در روز هفتم حداکثر تولید را داشتند که از بین آنها p. chrysogenum ptcc 5033 بالاترین مقادیر تولید کرد. در بررسی های مولکولی، به منظور ردیابی ژن های دخیل در سنتز پنی سیلین استخراج dna از جدایه ها انجام و واکنش زنجیره پلی مراز در شرایط استاندارد بررسی شد. نتایج نشان دهنده وجود ژن های دخیل در سنتز پنی سیلین در بسیاری از گونه ها بود. در مطالعه بیان ژن ها نرخ بیان ژن های pcbc و pcbab بررسی شد. جهت تعیین پروفایل ژن های فوق ابتدا از نمونه های کشت داده شده در محیط کشت مایع حاوی عصاره مخمر، ساکارز و آب مقطر در روزهای مختلف پس از کشت (5،7،11)، total rna استخراج و cdna تهیه شد. بیان نسبی ژن های مورد بررسی توسط تکنیک real time q-pcr انجام شد. نتایج این بررسی نشان داد در ایزوله های مورد بررسی بیشترین میزان بیان دو ژن در روز هفتم بود، هم چنین میزان بیان نسبی ژن ها در گونه های متفاوت نیز مختلف می باشد که در روز پنجم در ژن pcbab ایزوله p. chrysogenum ptcc 5033 و در ژن pcbc ایزولهp. chrysogenum ptcc 5037 بیشترین بیان را داشته اند. در روز هفتم در ژن pcbab ایزوله p. chrysogenum ptcc 5031 و ژن pcbc ایزوله p. chrysogenum ptcc 5033 بیشترین بیان و در روز یازدهم در ژن pcbab ایزولهp. chrysogenum ptcc 5071 و ژن pcbc ایزوله p. chrysogenum ptcc 5037 بیشترین بیان را داشته اند.